The essential guide to ELISA automation and reading
La guía esencial para la automatización y lectura de ELISA
PDF | 3.6 MB
Descargar ahora¿CUÁLES SON LAS VENTAJAS DE UTILIZAR SISTEMAS AUTOMATIZADOS PARA ELISA?
ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) es probablemente el método más extendido, realizado en microplacas. El ensayo requiere una o más etapas de lavado, dispensación, incubación, agitación y lectura. Es ampliamente utilizado en la investigación, análisis de alimentos, diagnóstico y otros. Hay varios factores que hacen que la automatización de ELISA sea muy deseable:
- Si bien el operador puede realizar otras tareas durante las incubaciones, realizar manualmente el ensayo requiere que el operador permanezca cerca durante varias horas y abandone otras tareas cuando el ensayo requiera su atención.
- Tanto el tiempo preciso de las etapas de incubación como la reproducibilidad del proceso de lavado son muy importantes para la consistencia y confiabilidad del ensayo. Estos pasos son difíciles de mantener constantes con la operación manual.
- Los laboratorios de mayor caudal de muestras que necesitan analizar muchas placas por día necesitarían más personal para poder realizar tantos ELISA.
La automatización resuelve todos estos problemas aumentando la fiabilidad y la reproducibilidad, aumentando el rendimiento, liberando al personal de tareas repetitivas y permitiéndoles centrarse en tareas más importantes. Sin embargo, existen diferentes formas de automatización de ELISA, por lo que es muy importante elegir el instrumento adecuado para la tarea.
TIPOS DE SISTEMAS AUTOMATIZADOS PARA ELISA
La mayoría de los instrumentos en el mercado que ofrecen automatización ELISA han sido diseñados para analizar inmunoensayos en grandes hospitales. Este tipo de equipo es capaz de realizar una gran cantidad de ensayos diferentes por día, pero es voluminoso, caro y requiere un mantenimiento frecuente y costoso. Además, los fabricantes de kits ELISA a menudo proporcionan estos instrumentos para respaldar sus aplicaciones. Por lo tanto, tienen poca flexibilidad para realizar ensayos de otros fabricantes, o se venden junto con un acuerdo para comprar una gran cantidad de kits durante un período de tiempo determinado. Por lo tanto, no siempre son la mejor opción para los clientes que no sean grandes hospitales.
Sistemas automatizados para ELISA según sus funciones
Todos los sistemas automatizados para ELISA ofrecen las funciones básicas necesarias para procesar un ELISA: dispensación de reactivos, lavado de microplacas, incubación y medición de absorbancia. Pero algunas otras funciones no siempre están disponibles y, si está buscando comprar un sistema para su laboratorio, es importante saber si las requiere o no:
- Manejo de la muestra: esto incluye la dilución de la muestra y la transferencia de la muestra del tubo a la microplaca. A menudo requiere la lectura de códigos de barras para la identificación y el seguimiento de las muestras. Si bien esta función puede ser muy conveniente si se tienen que procesar grandes cantidades de muestras, hace que el sistema sea mucho más complejo y, por lo tanto, más costoso e intensivo en mantenimiento.
- Medición de marcadores adicionales: mientras que la absorbancia es el marcador más popular utilizado en inmunoensayos, algunos ensayos usan quimioluminiscencia o fluorescencia en su lugar. Esto requiere que el sistema automatizado pueda medir esos tipos de señales, o que la placa se pase a un lector adecuado para su cuantificación.
- Análisis de resultados: la mayoría de los fabricantes de kits ELISA proporcionan hojas de cálculo simples en Excel para realizar los cálculos necesarios para obtener los resultados. Para muchos usuarios esto es totalmente suficiente. Sin embargo, en otros casos se requieren paquetes de software más avanzados que permitan un análisis más complejo.
Sistemas automatizados para ELISA según su rendimiento
Otra distinción importante es el número de muestras que se procesarán por día: los instrumentos para caudales de muestras bajos son asequibles y la solución perfecta para los laboratorios que procesan solo unas pocas placas por día. Por otro lado, los laboratorios con mayor caudal de muestras necesitan instrumentación más sofisticada y costosa para realizar el trabajo.
- Sistemas para bajo caudal de muestras: estas estaciones de trabajo generalmente pueden procesar una sola placa por ejecución y, a menudo, proporcionan una funcionalidad muy básica. Ofrecen una solución para que los laboratorios pasen del procesamiento manual a la automatización por primera vez, o realicen un número bastante bajo de ELISA por día.
- Sistemas para un caudal de muestras intermedio: estos son instrumentos preparados para contener de 2 a 3 placas, y a menudo incluyen el manejo de muestras. Son la solución de elección para los laboratorios que procesan más de unas pocas placas al día. Una alternativa a un único instrumento de rendimiento medio es utilizar 2 o más instrumentos de bajo rendimiento que trabajen en paralelo. Las ventajas son que los diferentes flujos de trabajo a veces son más fáciles de manejar en paralelo, y los instrumentos pueden servir como respaldo, en caso de que uno de ellos esté inactivo por mantenimiento o reparaciones.
- Sistemas de alto rendimiento: estos instrumentos pueden procesar simultáneamente 4 o más placas (hasta 16 no es raro) e incluyen amplias capacidades de manejo de muestras. Los laboratorios de alto rendimiento pueden necesitar una automatización personalizada o una solución semiautomatizada que permita el rendimiento requerido.
eBook destacado
MÁS ALLÁ DE LA AUTOMATIZACIÓN DE ELISA
Además de ELISA, muchos otros métodos basados en microplacas que implican lavado, dispensación, incubación y agitación se pueden automatizar utilizando nuestras estaciones de trabajo. Para tales flujos de trabajo, la mayoría de los pasos son realizados automáticamente por la estación de trabajo y el paso de lectura final se realiza en un lector especializado:
- Los inmunoensayos de quimioluminiscencia (CLIA) son muy similares a un ELISA, pero en lugar de la absorbancia, la luminiscencia se mide en un lector de luminiscencia.
- El enfoque es muy similar para los inmunoensayos de fluorescencia, pero en este caso, la fluorescencia se mide en un lector de fluorescencia.
- Los ensayos ELISpot también implican varias etapas de lavado, dispensación e incubación, que pueden automatizarse. Los puntos se capturan como una imagen digital usando un escáner o cámara especial, y se cuantifican típicamente, usando un software de análisis de imágenes.
- Los microarray se han realizado tradicionalmente en formato de portaobjetos, pero la necesidad de aumentar el rendimiento requiere un formato de microplaca. Esto permite la automatización de las etapas de manipulación e incubación de líquidos. Un escáner de microarray se encarga de la adquisición de imágenes.
Finalmente, el recubrimiento de microplacas, un método estrechamente relacionado con ELISA, también se automatiza muy a menudo.
Más sobre ELISA
¿Desea Más información sobre ELISA y nuestras soluciones para este método? Encontrará mucha información al respecto en nuestras páginas de aplicaciones sobre ELISA.